Desarrollo del PCR REP1 para diferenciar serovares de leptospira SP y comparación con la prueba inmunológica MAT (ensayo microscópico de aglutinación)
Palabras clave:
zoonosis bacteriana, leptospirosis, serovar, PCR RepResumen
Objetivo: desarrollar una prueba para diferenciar a nivel molecular los serovares de Leptospira sp.
Materiales y método: se estandarizaron las condiciones de PCR-Rep1 usando 25 serovares referenciales del laboratorio de zoonosis bacterianas; se desarrolló la sensibilidad de la prueba frente al método referencial “Técnica de microaglutinaciòn” (MAT),la repetibilidad y la especificidad .
Resultados: las condiciones optimas para el PCR Rep1 fueron: temperatura de hibridación: 49,1°C. Cloruro de Magnesio: 3mM. Enzima: 2,5 Unidades ,200uM dNTPs, 2uM Primer y 100 ng de ADN para un volumen final de 50 ul. El PCR Rep1 optimizado permitió diferenciar serovares de relevancia epidemiológica como: mankarso, icterohaemorrhagiae, cynoptery, pomona, pyrogenes, tarassovi, autummalis, bataviae canicola y wolffi de L .interrogans; ballum y javanica de L. borgpetersenii; asi como diferenciar entre las especies
L. weilii, L. kirscheni, L. santarosae, L. alexanderi, L. biflexa y L. noguch
